Virología Molecular

Líneas de investigación del grupo

El grupo de Virología Molecular forma parte del Grupo para el Estudio de la Infección por el Virus de la Hepatitis C (HCV) junto a la Unidad de Enfermedades Infecciosas (Dr. Elisa Martínez Alfaro) y el Servicio de Digestivo (Dr. Ricardo Pérez Flores) del Complejo del Hospital General Universitario de Albacete. El objetivo principal de este grupo es el “análisis de las relaciones estructura-función del complejo replicativo del HCV“.

Virología Molecular

La replicación consiste en la generación de una copia de RNA de polaridad negativa RNA(-) a partir del RNA genómico (de polaridad positiva RNA(+)), y posteriormente más copias de RNA(+) que serán el sustrato para nuevas rondas de replicación o traducción, o se empaquetarán como genoma en nuevas partículas virales. La replicación ocurre en complejos multiproteicos asociados a la cara citoplasmática de la membrana del retículo endoplásmico. Debido a la importancia de este proceso y a que no existen proteínas homólogas en humanos, las proteínas virales de este complejo constituyen una excelente diana terapéutica. La composición y estructura de estos complejos es desconocida aunque se sabe que existen proteínas no estructurales del virus (RNA polimerasa dependiente de RNA, helicasa, proteasa, etc.) y proteínas del hospedador. También se sabe que la polimerasa funciona como un oligómero, pero se desconocen el o los dominios implicados en la oligomerización.

Con estos antecedentes, los objetivos del grupo son:

  1. Sobre-expresar y purificar la polimerasa de HCV (proteína NS5B), tanto la salvaje como las mutantes generadas por mutagénesis dirigida o provenientes de pacientes, así como de proteínas del hospedador que interaccionan con NS5B (como el receptor de estrógenos α -ERα-).
  2. Análisis de la actividad polimerasa (inicio de síntesis y elongación, unión a RNA, etc.). Especialmente nos interesan las posibles diferencias conformacionales de NS5B necesarias para la actividad de novo y la de extensión de primer, así como el efecto del GTP en dichos procesos. También se analizará el efecto sobre la actividad polimerasa de proteínas del hospedador.
  3. Estudios de interacción proteína-proteína para determinar los dominios implicados en dicha interacción. Se está caracterizando la interacción NS5B-NS5B y NS5B-ERα. Para ello se ha desarrollado un método basado en Förster Resonance Energy Transfer (FRET). Esta metodología es una herramienta útil para el estudio del efecto de inhibidores de NS5B que afecten a la interacción entre proteínas.

En la actualidad se está iniciando una nueva línea de investigación sobre la polimerasa del Virus de la hepatitis E (VHE). El VHE en un virus RNA de cadena positiva que causa hepatitis agudas que pueden resultar mortales en mujeres embarazadas. Replica principalmente en hepatocitos y se postula que dicha replicación debe ser muy similar a la del VHC. Dificultades metodológicas (no crece bien en cultivo celular), han hecho que numerosos aspectos de su biología molecular sean aún desconocidos. Con la experiencia adquirida con la proteína NS5B del VHC nuestro grupo de investigación se ha propuesto la caracterización in vitro de la polimerasa del VHE tanto a nivel estructural como funcional.

  • 100%

Proyectos de investigación

  • Título: Variability in the mutation rate of RNA viruses
    Entidad financiadora: Unión Europea
    I.P.: Responsable en la UCLM: Antonio Mas (I.P.: Rafael Sanjuán, UV)
    Duración, desde: 01/01/2012   hasta: 31/12/2017
  • Título: Análisis funcional de la interacción entre factores celulares y la polimerasa NS5B del virus de la hepatitis c
    Entidad financiadora: Consejería de Eduación y Ciencia
    I.P.: Antonio Mas López
    Duración, desde: 01/04/2010   hasta: 31/03/2013
  • Título: Interacciones proteína-proteína como moduladoras de la transición inacción-elongación en el ciclo de síntesis de la ARN polimerasa de virus de la hepatitis C
    Entidad financiadora: Ministerio de Ciencia e Innovación
    I.P.: Antonio Mas López
    Duración, desde: 01/07/2010   hasta: 30/06/2012
  • 100%

Publicaciones científicas

  • García-Cano J, Ambroise G, Pascual-Serra R, Carrión MC, Serrano-Oviedo L, Ortega-Muelas M, Cimas FJ, Sabater S, Ruiz-Hidalgo MJ, Sanchez Perez I, Mas A, Jalón FA, Vazquez A, Sánchez-Prieto R. Exploiting the potential of autophagy in cisplatin therapy: A new strategy to overcome resistance. Oncotarget. 2015 Jun 20;6(17):15551-65. (A).
  • López-Jiménez AJ, Clemente-Casares P, Sabariegos R, Llanos-Valero M, Bellón-Echeverría I, Encinar JA, Kaushik-Basu N, Froeyen M, Mas A. Hepatitis C virus polymerase-polymerase contact interface: Significance for virus replication and antiviral design. Antiviral Res. 2014;108:14-24. doi: 10.1016/j.antiviral.2014.04.009. (A).
  • Hillung J, Ruiz-Lopez E, Bellon-Echeverria I, Clemente-Casares P, Mas A. Characterization of the interaction between HCV NS5B and the human estrogen receptor alpha. J Gen Virol. 2012. 93[pt 4]: 780-785. [Epub 2011]. (A).
  • Ojosnegros S, Perales C, Mas A, Domingo E. Quasispecies as a matter of fact: Viruses and beyond. Virus Res. 2011. 162[1-2]: 203-215. (A).
  • Sabariegos R, Mas A, Clemente-Casares P. Population Diversity and its Relationship with Infectious and Tumor Diseases. Current Immunology Reviews. 2011. 7: 50-56. (A).
  • Clemente-Casares P, López-Jiménez AJ, Bellón-Echeverría I, Encinar JA, Martínez-Alfaro E, Pérez-Flores R, Mas A. De Novo Polymerase Activity and Oligomerization of Hepatitis C Virus RNA-Dependent RNA-Polymerases from Genotypes 1 to 5. PLoS One. 2011. 6[4]: 18515. (A).
  • Bellón-Echeverría I, López-Jiménez AJ, Clemente-Casares P, Mas A. Monitoring Hepatitis C Virus (HCV) RNA-dependent RNA polymerase oligomerization by a FRET-based in vitro system. Antiviral Res. 2010. 87[1]: 57-66. (A).
  • Más A, López-Galíndez C, Cacho I, Gómez J, Martínez MA. Unfinished Stories on Viral Quasispecies and Darwinian Views of Evolution. J Mol Biol. 2010. 397[4]: 865-877. (A).
  • Rodriguez-Manzano J, Miagostovich M, Hundesa A, Clemente-Casares P, Carratala A, Buti M, Jardi R, Girones R. Analysis of the evolution in the circulation of HAV and HEV in Eastern Spain by testing urban sewage samples. J Water Health. 2010. 8[2]: 346-354. [Epub 2009]. (A).
  • Clemente-Casares Girones R. Hepatitis E virus genotype P, Rodriguez-Manzano J, 3 and sporadically also genotype 1 circulate in the population of Catalonia, Spain. J Water Health. 2009. 7[4]: 664-673. (A).
  • Aceves-Luquero CI, Agarwal A, Callejas-Valera JL, Arias-González L, Esparís-Ogando A, del Peso Ovalle L, Bellón-Echeverria I, de la Cruz-Morcillo MA, Galán Moya EM, Moreno Gimeno I, Gómez JC, Deininger MW, Pandiella A, Sánchez Prieto R. ERK2, but not ERK1, mediates acquired and ‘de novo’ resistance to imatinib mesylate: implication for CML therapy. PLoS One. 2009. 4[7]: 604-607. (A).
  • Alves-Rodrigues I, Mas A, Diez J. Xenopus Xp54 and human RCK/p54 helicases functionally replace yeast Dhh1p in Brome Mosaic Virus RNA replication. J Virol. 2007. 81: 4378-4380. (A).
  • Mas A, Jordán J. La gripe aviar. ¿La primera pandemia del siglo XXI?. Anales de la Academia de Farmacia Santa Maria de España (Murcia). 2006. : 673-700. (A).
  • Valero ML, Sabariegos R, Cimas FJ, Perales C, Domingo E, Sánchez-Prieto R, Mas A.Hepatitis C Virus RNA-Dependent RNA Polymerase Interacts with the Akt/PKB Kinase and Induces Its Subcellular Relocalization.. Antimicrob Agents Chemother. 2016 May 23;60(6):3540-50. doi: 10.1128/AAC.03019-15. Print 2016 Jun.
  • Geller R, Estada Ú, Peris JB, Andreu I, Bou JV, Garijo R, Cuevas JM, Sabariegos R, Mas A, Sanjuán R.Highly heterogeneous mutation rates in the hepatitis C virus genome. Nat Microbiol. 2016 Apr 18;1(7):16045. doi: 10.1038/nmicrobiol.2016.45.
  • Clemente-Casares P, Ramos-Romero C, Ramirez-Gonzalez E, Mas A.Hepatitis E Virus in Industrialized Countries: The Silent Threat. Biomed Res Int. 2016;2016:9838041. doi: 10.1155/2016/9838041. Epub 2016 Dec 14.

 

Antonio Mas López

Director

Personal

Investigadores de plantilla
Estudiantes

Centralita: (+34) 967 599 200

Direcciones y teléfonos

Centro Regional de Investigaciones Biomédicas

Complejo de la Facultad de Medicina de Albacete

Universidad de Castilla-La Mancha

C/ Almansa, 14.

02008 Albacete (España)

telefono (-34) 967 599 200, Ext. 2279

fax (+34) 967 599 360

  • 100%